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用胰蛋白酶預處理沃氏甲烷球菌G01菌株的原生質體,可得由內向
外翻(inside—out)的胞束,
冰凍斷裂技術已被應用到好幾個產甲烷菌的研究上,這種技術可把
原生質膜的中心分開顯示其內部的外質層和原生質疏水面的結構。目前
已制備到萬氏甲烷球菌、沃氏甲烷球菌、聯合甲烷絲菌、馬氏甲烷八疊
球菌的冰凍刻復制物,所有這些制備物上都顯示了具多內膜顆粒的典型
原生質(PF)斷面(疏水區)和具凹陷、無顆粒或顆粒相對很少的外質(EF)
面。DeRosa等人(1986)發現,在嗜熱酸菌中,具豐富C40一烴鏈的四醚
酯橫跨富含四醚具極性頭部的原生質膜自》兩側,這一推論是部分建立
在缺乏內膜斷面條件下。這一假設為前述的結果所證實,既然這些產甲
烷菌是四醚負極并且具有二醚和羥二醚極性脂。從熱動力學觀念來看,
用冰凍斷裂術使四醚頭部共價鍵斷裂是難以解釋的,很可能嗜熱自養甲
烷桿菌的四醚脂在膜的不能斷裂的特殊區域被分開,那些斷裂區域是仍
含有二醚脂的膜區域。前面提到的那些產甲烷菌都具有大小為14X28nm
未知功能的圓柱狀顆粒。在原生質疏水斷面可見到這種顆粒。
為了清楚地論述斷面四醚雙層組織,膜內層相對頻繁地跨越斷面及
二醚脂與四醚脂穩定比例的存在是必要的。鑒于二醚脂與四醚脂的比例
隨其長溫度的變化而變化,研究人員用簡氏甲烷球菌為材料來研究四醚
雙層結構。醚(約為膜脂總量的90%)生長在50℃時含四醚脂2%,7℃時
含四醚脂45%;相應地跨越斷面到膜四斷面的頻率50℃時為1:l,而70
℃為9:1。用去污劑透析幾種產甲烷菌的極性脂可抽提到脂質體,由于
它們有非常穩定的脂質組成,這些脂質體也許具有抵抗化學和物理干擾
的特性并有生物技術價值。沃氏甲烷球菌脂質體的冰凍斷面(從母膜中
除去蛋白質)顯示了凹凸的疏水斷面都是光滑的。從未觀察到復斷面,
這表明脂質體是多層狀結構。
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