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熒光抗體法首先是用抗原多次免疫動物,使之產生抗體,然
后制備熒光抗體以產生高效價。抗體的特異性強,是制備熒光抗
體的先決條件。效價高和特異性強則熒光抗體沉積在抗原上的沉
積層厚,與抗原反應快,結合緊密,熒光強,也增加了反應的敏
感性。
制備熒光抗體的基本過程包括免疫動物,制備抗血清,提取
免疫球蛋白,標記熒光色素和純化熒光抗體,最后進行熒光抗體
1.免疫動物被免疫的動物必須選擇健康成年動物,雄性較
好,體重合乎一定要求,如家兔應在3公斤左右。免疫過程中應
注意營養和衛生管理。免疫注射后一月無良好的抗體反應,,或在
規定注射日程后效價不高,再注射1~2次,若反應仍不佳者應
棄去。
對未免疫動物一次注射,抗體生成慢,效價低,持續時間短,
但特異性高。再次注射出現再次反應效價上升較快,持續時間
長。間隔一定時間,多次注射可獲得高效價免疫血清,但抗體特
異性降低。免疫注射時間間隔太短,起不到再次反應的效果,太
長則免疫過程久,影響血清特異性。具體時間要以抗原性質和抗
體反應而定。一般間隔時間為1-2周
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