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本文標題："利用化石材料進行DNA分析技術-化石顯微鏡"
新聞來源：未知 發布時間：2019-3-29 4:03:24 本站主頁地址：http://www.pzfczx.com
利用化石材料進行DNA分析技術-化石顯微鏡
化石DNA的提取與甄別Edward M．G01enberg
利用化石材料進行DNA分析時，研究范疇(而不是研究者本身)規定了研
究材料的性質、保存時間和保存方式。上述任一因素都將影響實驗的成敗
或者DNA保存的可能性。據報道，成功提取DNA的材料包括琥珀包埋物(Cano
ef a／．，1992；DeSalle efa／．，1992；Poinar efa／．，1993)、植
物壓膜化石(Golenberg efa／．，1990；Soltis efa／．，1992)、哺乳動
物糞便中的植物材料(Rogers&Bendich，1985)、干燥的蠟葉標本(Rogers&B
endich，1985)，以及考古發掘的殘留物，如空氣干燥的(Helentjaris，19
88)、炭化的(Helentjaris，1988；Horai efa／．，1991；Brown efa／．
，1994)甚至是水浸材料(Lawlor efa／．，1991)。需要指出的是，任何一
種上述材料都曾有很多從單個標本中獲得可靠DNA失敗的報道(Sidow efa／
．，1991；Bailey ef a／．，1996； H6ss e，a／．，1996 a，b； Po
inar ef a／．，1996； Austin e，a／．，1997； Yang efa／．，19
97b)，這提示我們應該用大量的樣本進行研究，以增加成功的可能性。盡
管樣本的年代與保存下來的DNA片段的大小，以至DNA保存的可能性之間沒
有線性關系(陷筋o1989；Habelberg&Clegg，19915 Kelman&Moran，]996)
，但是迅速干燥年輕標本比已水解的、非常老的標本更能產生較穩定的結
果。而且，有關古DNA的研究，目前的大部分工作集中在動物標本上，所以
對保存DNA的特性的了解主要來自于這些材料。然而，在動物組織中，一般
情況下由于動物自身存在的或者身體表面的細菌所產生酶的消化作用，DNA
的降解在動物死亡后迅速發生；而在植物體內，伴隨著組織分解(葉片脫落
、種子傳播、枝葉斷裂)，細胞的死亡并不很快發生，其內部細菌的生長也
相對較慢，因此，植物組織內DNA降解的初始速率較慢。總而言之，植物的
埋藏特性決定了其DNA具有較長的保存時間。
在這一章中，我將描述從陳舊的植物材料中提取DNA的一般方法，討論
在古DNA研究中我們應該特別注意的方面，提出甄別古DNA序列的方法。29
．] 實驗設計和提取技術
從化石、亞化石或者蠟葉標本中提取DNA與從現代新鮮材料中提取DNA
的技術基本一致(參見Sytsma，1994)，但是進行古DNA研究時，我們需要特
別注意以下3個方面：污染物、抑制物、微量的降解DNA。要防止任何外源
的，無論是古代還是現代DNA的污染，設置防止外源DNA污染的對照實驗尤
為重要。任何時候，所有用于提取DNA的工具和材料都應該是一次性的，需
要重復使用的器具必須放在0．5％的次氯酸鈉溶液中浸泡幾個小時，用蒸
餾水反復沖洗，然后放在短波紫外光下照射30分鐘。溶液必須首先分裝成
小體積，夠5—]o次提取即可，以防止剩余溶液所造成的隨機污染。如果條
件允許，應
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