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本文標題:"昆蟲細菌、真核生物(酵母和線蟲)檢測顯微鏡"

新聞來源:未知 發布時間:2017-3-24 16:13:01 本站主頁地址:http://www.pzfczx.com

昆蟲細菌、真核生物(酵母和線蟲)檢測顯微鏡

由同源重組實現基因尋靶

  在標準的遺傳分析中,是篩選大量的突變的細胞或整個生物體以尋
找所希望的表現型,從而獲得那種決定著所選定的表現型的基因突變。
遺傳操作最終可以產生所研究的基因中只有一個突變的后代。這種策略
對于細菌、低等真核生物(酵母和線蟲)以及無脊椎動物(果蠅)都很好用
,因為這些生物的壽命短,也有大量的遺傳連鎖圖。然而,要研究哺乳
動物的遺傳性狀,如小鼠的,標準的遺傳學方法就費時費力而且困難。
由于重組DNA技術以及可資利用的克隆的基因序列的出現,研究工作者
開始設計直接的方法來操作小鼠的基因組以發展研究人的遺傳病的動物
模型。這種策略是反求遺傳學的一種形式,其基礎是能夠利用小鼠的胚
胎干細胞系(ES細胞)在體外進行DNA操作而引起所選定的基因中發生專
一的突變。把這些已發生改變的胚細胞再引回到正常的小鼠胚中,就有
可能產生其中有某種種系突變的轉基因動物。

  小鼠的反求遺傳學的分子基礎是能夠利用同源重組以得到所希望的
基因突變。早期的開拓性工作稱為定向基因轉移。隨著酵母中同源重組
的成功,這兩個小組,還有其他人,最終發現了鑒定宿主基因與外加DN
A之間已發生同源重組的ES細胞的方法。小鼠細胞中的定向基因轉移決
定于選擇一種能夠鑒定稀有細胞的方案,這種細胞中已發生了所希望的
同源重組。

  發展定向基因轉移技術的初衷是建立動物模型,以便能夠詳細研究
人的特異的疾病可用同源重組法插入新霉素抗性基因以破壞原有基因。
在利用這種技術時,發育生物學家使之最優化了,他們把具有定向突變
的細胞再引入到小鼠中,于是被破壞的基因就會穩定地遺傳下去。這種
技術利用的是小鼠的胚胎干(ES)細胞,這是由懷孕母鼠的胚泡得來的。
一旦分離出了突變的ES細胞的無性系,就將這些細胞注入第二個小鼠胚
胎中,于是這一團細胞就植入在假孕的母鼠體內進行發育。小鼠出生后
,它們既有定向基因轉移的ES細胞,又有來自宿主胚的細胞。

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