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1.花生仁原料:新鮮花生仁經脫膜及去芽,利用粉碎機打碎。
2.稱取2克花生粉,加入20℃以下之正己烷(丙酮亦可),以均質機5000rpm(ACE homogenizer)均質2分鐘。
3.均質液以濾紙(TOYO #2 濾紙)抽氣過濾,花生粉攤于白色紙張讓溶劑蒸發后,
再用砂網過濾,即為正己烷脂粉(丙酮脫脂粉)。
4.稱取100毫克脫脂粉(約含40毫克蛋白質)于離心管,添加6毫升pH7.9,0.2M
Phosphate buffer 以Polytron均質1分鐘(15000 rpm),再利用2毫升相同buffer洗均質頭併入均質液中。
5.靜置30分鐘后,離心(15000 rpm 20℃,15分鐘),以吸管吸出中層澄清液(即為可溶性蛋白液)。
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