本文標題："關于顯微鏡下原生質體的外觀"

關于原生質體

    * 滲透壓的關鍵：原生質體是一個具有細胞膜，但不具細胞壁的植物細胞。由于原生質體沒有細胞壁，故其對滲透壓的改變是非常敏感的，而且必須儲存在一個等滲的溶液，來防止其破裂。高滲的溶液將導致原生質體縮小。

    * 原生質體的外觀：原生質體是呈圓球形的，明顯的三度空間結構且獨立地漂浮在溶液內。葉綠體可能被液泡推向相反的一個小區域（液泡膜無法顯微鏡下見）。原生質體的大小一般而言是一致的。但不同的組織來源及不同的滲透壓溶液可能會導致原生質體的大小不一。比較原生質體的大小和未處理的葉子單位面積的細胞大小。

    * 組織來源：各種植物組織可提供產生原生質體的細胞。這個方法已成功地應用在茄科植物（Solanaceous）（馬鈴薯和蕃茄的家族）的葉肉細胞上。原生質體也可以懸浮培養的方法來分離（單一細胞懸浮在溶液中成長）。亦有癒合組織培養（癒合組織是未分化的組織），胚囊、根和幼苗的培養。具有薄的表皮組織最適合做為原生質體製備的材料。

    * 可能的延伸：將原生質體放在不同（已知的）滲透壓溶液中，學生可稀釋緩沖溶液（0.625M）來獲得一個細胞可容忍的滲透溶液。

a.嘗試去決定原生質體可能的直徑（diameter）范圍。

b.嘗試去決定原生質體內的滲透壓濃度。

c.比較在相同的滲透壓溶液下，原生質體和植物細胞的不同。

為什么這實驗要提出植物可容忍不同滲透壓和其脫水的能力？請比較植物和動物之間容忍各種滲透壓和脫水的情形。比較陸生植物或水生植物和動物間細胞內水分調節的不同適應情形。

接下來是原生質體的滅菌工作：全部的步驟都要用滅菌的設備。關于滅菌的設備及葉片的表面滅菌指導可顯微鏡下surface sterilization of biological materials。接著下面的步驟。

1.用滅菌過的棉布【注：尼龍網較好用】，過濾原生質體及葉片的懸浮液至50ml圓錐形離心管。先用5~10ml滅菌過的mannitol（不加酵素），潤濕培養盤，并同樣地潤濕棉布過濾器。然后過濾原生質體到離心管。

2.小心地離心（75Xg，2min），用滅菌過的pipette吸取原生質體懸浮液。

比較四個界之間的細胞壁（全部的細胞都有細胞膜）：

動物：無細胞壁；細菌：細胞壁有連結性的蛋白質和多醣類；酵母菌（菌類）：為具多醣類及幾丁質的細胞壁；植物：具纖維素的細胞壁（多醣類）包埋在其他多醣類和蛋白質的基質中。細胞壁的厚度隨著植物細胞的年齡和不同組織而不同。

預防措施：

1.假如你只要觀察原生質體，那么精細的滅菌設備是不需要的，這個步驟可以不必使用酒精。

2.利用原生質體做轉殖的準備，則需要無菌設備的使用。即需要酒精和火的使用。

3.酒精是易燃的，要小心地使用。