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染液染成紅色ZiehI-Neelsen抗酸染色法
Ziehl—Neelsen抗酸染色法(The Ziehl—NeelsenAcid—Fast St
ain)是從Paul Ehrlich 1882年發明的染色法改進得到的。該染色
法本來是用于檢測引起肺結核和麻風病的分支桿菌(Mycobacterium
)。在固定了微生物的載玻片上覆蓋石炭酸品紅(carbolfuchsin)液
并加熱、漂洗,然后用含3%鹽酸(HCl)的95%乙醇液脫色,再次漂
洗,并用Loeffer氏亞甲基藍染色。大多數細菌經脫色會除去石炭
酸品紅染料。然而,那些抗酸菌會保留亮紅色。這種性質是由于這
些細菌細胞壁中的脂質成分造成的。非抗酸菌將失去紅色,而被Lo
effer氏亞甲基藍復染液染成藍色。特殊染色方法
負染法(Negative Staining)當標本本身或其中一部分,比如
莢膜,不吸收染料,那么就可以采用負染法。莢膜是一層包圍在許
多細菌表面的多糖物質,起到保護宿主的屏障作用。它同時也阻止
了染色。在負染中,微生物周圍背景充滿染料,如墨汁或黑色素(n
i—grosin)等酸性染料。染色結果并未使菌體本身著色,而使其在
暗色背景下保持透亮。接著用簡單染色或復合染色來顯現出莢膜內
的細胞。這樣,典型的實驗結果是暗背景,透亮莢膜,莢膜內是被
結晶紫染成的紫色細胞或被亞甲基藍染成的藍色細胞。
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