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貼壁細胞培養過程-帶微載體顆粒的灌注培養
貼壁細胞培養過程
貼壁細胞培養的工業放大會遇到特殊問題。由于貼壁細胞系有
表面貼附要求,為了增加細胞密度,就要增加反應器的比表面積。
培養貼壁細胞的傳統方法是滾瓶培養,多層板系統。現在,滾瓶培
養和多層板系統只限于使用在特殊的場合,如EPO生產、基因治療
和疫苗生產。Unger等[30]模擬了滾瓶反應器中的流動和流體混合
,并在實驗裝置中用顆粒成像流速儀證實了理論結果。增加了垂直
擺動,改善了滾瓶系統中混合的速率和整體性。這個例子說明,即
使很完善的反應器系統,利用工程原理進行設計改進,仍有潛力可
挖。用于貼壁細胞培養的非傳統生物反應器還有鼓泡塔反應器,組
合有徑向流固定床的膜透析反應器和灌注填充床反應器。
培養貼壁細胞的最主要的生物反應器是在攪拌罐中的微載體懸
浮培養系統。微載體攪拌罐反應器的規模已達10000L,過程優化容
易,流加設計有彈性。由于技術原理相似,工業上更容易建立平臺
技術。開發懸浮和貼壁培養的流加工藝時,原理和方法是一致的,
目標是減少廢物積累和營養變異,建立高密度的細胞培養。
目前,貼壁培養工藝的主要研究熱點是帶微載體顆粒的灌注培
養。。的攪拌罐反應器中進行微載體灌注培
養,用CHO細胞生產單細胞克隆抑制因子。反應器中安裝了內部旋
轉過濾器,截留細胞/微載體,運行了2個月。這個過程的重要特
征是能夠直接接種進行微載體培養,無需細胞消化。主要參數都容
易地從3L放大到15L規模
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