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植物體內含有許多種化學物質。在得到植物組織切片之后,可以通
過組織化學(顯微化學)染色的方法使不同類型的化學成分在顯微鏡
下得以顯示,從而了解這些物質在植物的組織、細胞內的空間分布
。用于組織化學研究的切片,根據研究對象和所要檢測的化學物質
的不同,可采用石蠟切片,有時要求新鮮材料采用徒手切片或冰凍
切片。在植物組織切片過程中恰當地運用一些簡單的組織化學染色
方法,一方面可以確定細胞壁及細胞后含物的化學性質,另一方面
也有利于分辨組織和細胞的結構。
顯示細胞壁化學組成的方法
(1)纖維素:植物細胞的細胞壁中最主要的成分是纖維素。常
用的顯色方法為碘一硫酸法:取1%的碘一碘化鉀溶液滴加在材料
上,再加1滴66.5%的硫酸,纖維素細胞壁與碘和硫酸作用而變成
藍色。在細胞中,纖維素的成分愈多和其他后來參加組成細胞壁的
成分愈少,則藍色愈明顯;在次生壁中,纖維素已為木質素等覆蓋
j不變藍色。
(2)木質素:木質素是以苯丙烷為結構單元通過醚鍵一碳鍵彼
此連接成具有三維空間結構的高聚物。因為植物細胞壁上的木質都
成復合的狀態(tài),木質素的顯微化學方法雖然很多,但一般只能示知
其存在的可能性而已。間苯三酚反應是植物顯微化學中確定木質化
的最常用和最簡單方法:切片先用l滴鹽酸浸透,然后,滴上1滴5
%~10%的間苯三酚酒精溶液,木質化細胞壁可現出櫻紅色或紫紅
色(因顏色會慢慢褪去而不宜制作永久制片)。染色稍為穩(wěn)固的方法
為硫酸苯胺(或鹽酸苯胺)法:在切片上滴上1滴硫酸苯胺試劑(硫酸
苯胺19,蒸餾水70mL,95%酒精30mL,硫酸30mL),木質化的細胞
壁現出鮮黃色或姜黃色,可制成保持期稍久的永久制片。
(3)栓質和角質:栓質和角質都是特種高分子飽和或不飽和脂
肪酸的衍生物。用碘一硫酸或碘一氯化鋅法染色,栓質和角質都可
顯黃色或淺褐色,但木質、半纖維素等成分也被染成同樣的顏色。
用蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)染色,栓質和角質呈現橘紅色反應,不過這種
反應也并非栓質和角質的特異性反應。
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