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防止胞內蛋白裂解的另一種方法是開發利用分泌性載體,在分泌性
載體中,一段信號序列和目標蛋白連接在一起。如果該蛋白質能在
一種宿主中被分泌出來,那么至少在使用正確信號序列的情況下,
它通常也能被其他的宿主分泌。將蛋白質的天然信號序列(例如,
來自于真核生物的蛋白質)用宿主專一性的信號序列替代通常能夠
促進分泌。
分泌過程是很復雜的,將一段信號序列和正常的非分泌性蛋白
(例如,胞質蛋白質)連接在一起并不能確保分泌,雖然已經報道了
幾個有關正常胞質蛋白質分泌的例子。顯然,成熟形式的蛋白質含
有分泌過程所必需的“信息”,但是沒有通用的規則明確規定,當
一段信號序列和正常的非分泌性蛋白(例如胞質蛋白質)連接在一起
時將導致分泌發生。
為了確保構建過程的遺傳穩定性,以及為了對理想的載體一宿
主組合的選擇有所幫助,載體應該被設計成可以在選擇性生長條件
下使宿主存活。最常用的策略是在載體中插入一個編碼抗生素抗性
的基因。常用的克隆質粒pBR322含有氨芐西林和四環素的抗性基因
。在篩選經人工設計修飾后的質粒時,多抗性基因是很有幫助的。
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