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復性的濾膜綾試驗
由硝基纖維素制成的很薄的濾膜,這些濾膜與單鏈DNA結合得
非常牢固,但既不能與比鏈DNA也不勇氣與RNA結合,它們為測定
雜交提供了重要的技術。
假設有一個變性的DNA樣品正在進行復性,地復性開始后的任
何時間,樣品由雙鏈復性分子和還沒有復性的單鏈組成,如果讓
樣品通過硝基纖維素濾膜過濾,復性DNA穿過濾膜而單鏈阻留在
濾膜上,這樣就可以測定復性DNA部分。
也可按下法在濾膜上進行復性,把一個變性的DNA樣品過濾,
單鏈沿著糖-磷酸骨架緊密地結合在濾膜上,但堿基仍是自由的
,然后將濾膜置于小管,管中盛有含少量放射性標記的變性DNA
溶液和防止 單鏈DNA再與濾膜結合的試劑,經過一段時間復性后
洗滌濾膜,只有發生過復性,才能在濾膜上發現放射性。
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