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使用分光光度計測量酵母菌是不適用的-顯微常識
為了保持培養結果穩定,通常做法多半是使試管傾斜,通過
暴露液體的最大表面來增加通氣盤,而且天天用手振動它。如果
不停地搖動或轉動試管也能達到充分的通氣和較好的混合。
所以,該試管方法較快且好,已經標準化,而且結果也是比較可靠
通常用肉眼來確定菌的生長,是把陰性反應管與陽性反應管
進行對照。有的時候,在每一管子的后面襯以有黑線的卡片,觀
察已生長的酵母菌的混濁程度,把所呈現的混濁程度作為不同生
長狀況的標準。而用比色測定菌體生長會更好一些,因為它能得
出客觀的測量結果(它能依次折合出干重來)。不過,對于具有
絮凝作用的酵母菌是不適用的。這些試驗雖然能夠使用分光光度
計側量,但比濁法通常對于分類學的生長試驗更方便些。用比濁
法測量散射的光線適合于測定試管里的生長,但在不規則的試管
中則很不靈敏。對于大多數鑒定來說,雖然經常培養測定到4
周,但上述方法對于測定生長一周以上的酵母菌是無效的。
平板影印培養法
把在“主”培養皿內培養基表面生長的高達25個酵母菌落復
印(即同時接種)在具有不同碳源的另一些培養皿內。復印模用
平絨或棉花墊制做。
用一根直的金屬絲把25株正活潑生長著的菌接種到一個培養
皿內的營養瓊脂培養荃(如,麥芽汁一酵母膏一偷萄糖一蛋白
陳)的表面,這些培養物在瓊脂平板上排列成一定的樣式,讓這
些酵母菌過夜生長,長出分離的小菌落。每個培養皿必須有一個
標記來定向。上述試驗培養皿,每一個都含有氮源基礎培養基,
約25mM碳源(陰性對照管沒有)和2% (W/V)的水洗瓊脂。
平絨布應包在鋁箔中,進行高壓蒸汽滅菌。準備一個圓柱形的木
棒,其直徑正好放進培養皿的底部,把無菌的平絨布復蓋在上
面。具體做法是:先用一個無菌的培養皿底蓋壓在木棒頂端的平
絨布上面,再用一根金屬環或橡皮筋把平絨布固定住。
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