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本文標(biāo)題："熒光顯微鏡觀察標(biāo)本染色的方式有哪些"
新聞來(lái)源：未知 發(fā)布時(shí)間：2014-2-20 13:48:20 本站主頁(yè)地址：http://www.pzfczx.com
熒光顯微鏡觀察標(biāo)本染色的方式有哪些
吖啶橙熒光染色法吖吮橙是一種熒光染料，與細(xì)胞核結(jié)
合后，經(jīng)激發(fā)產(chǎn)生出亮綠色的熒光。通常，除了一些未經(jīng)固定容易
變形、甚至破碎的原生動(dòng)物，可經(jīng)100^'200餓酸蒸氣固定外，無(wú)須
固定便可直接染色。用重蒸餾水配制1寫(xiě)的吖啶橙母液，置于暗處
保存?zhèn)溆谩Ｊ褂脻舛葹槿f(wàn)分之一，即取母液稀釋100倍。在載玻片
上滴上一滴濃集原生動(dòng)物，再滴上一滴萬(wàn)分之一的吖啶橙染色液，
加上蓋玻片，立即置于熒光顯微鏡下觀察，可見(jiàn)到細(xì)胞核發(fā)出深黃
綠色的熒光。細(xì)胞質(zhì)則呈現(xiàn)微弱的黃色一紅色的熒光。時(shí)間一長(zhǎng)，
熒光會(huì)慢慢變?nèi)踔料В市枳ゾo時(shí)間觀察。
PA-PI熒光染色法PAPI是一種特異性非常強(qiáng)的專染DNA的熒光染料，
非常靈敏。用微吸管吸取一些原生動(dòng)物置于梅氏蛋白的玻片上。
盡量吸去水分，讓原生動(dòng)物蟲(chóng)體呈單層，平鋪于載玻片上，注意不能
令其干燥。待蟲(chóng)體快要開(kāi)始干燥時(shí)，滴上一些卡諾氏固定液固定，
并使蟲(chóng)體粘貼在載玻片上。固定時(shí)間約5分鐘，之后，經(jīng)蒸餾水洗2^-3次，
洗脫固定液，空氣干燥。
滴加上0.5-1克/毫升濃度的重蒸餾水配制的DAPI染色液，便可在熒光顯微鏡
下觀察。細(xì)胞核發(fā)出強(qiáng)烈的白色帶微黃的熒光。
由于DAPI是專門與DNA結(jié)合、形成復(fù)合物的染料，故原生動(dòng)物發(fā)出熒光之處，
便是DNA所在地。正因?yàn)槿绱耍珼API熒光染色法顯示原生動(dòng)物核較之其他
熒光染色法優(yōu)越，可以顯現(xiàn)出細(xì)胞核內(nèi)DNA量的變化和位置。對(duì)于研究其有性生殖，
特別是纖毛蟲(chóng)的接合生殖過(guò)程中，核器的發(fā)育變化過(guò)程十分適合。同其他熒光染
色一樣，時(shí)間一長(zhǎng)，DAPI的激發(fā)熒光也會(huì)逐漸變?nèi)踔料В仨氉ゾo時(shí)間觀察或拍照
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