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本文標題:"反射式熒光顯微鏡的一些應用-光學儀器常識"

新聞來源:未知 發布時間:2013-5-7 19:50:36 本站主頁地址:http://www.pzfczx.com

單分子偵測因可呈現動態行為與動力參數的真實波動與分布、可進行蛋白質反應事件操縱與反應之定量分析、
且反應毋須同步,故為生物分子研究之重要且實用的方法。而所謂單分子熒光顯微術,
乃是利用適當波長的激光,激發所選擇的熒光標識分子,透過對熒光標識分子的偵測與觀測,追蹤目標分子的動態行為。 


主要是關于建立一套稜鏡式全反射顯微熒光顯微術系統,以進行單分子研究。全反射顯微術成功的關鍵,
在于有效地降低背景熒光值。

全反射在界面所建立的漸逝場,其強度為入射光能量的數倍,并隨離界面的距離增加而呈指數性衰減,
其滲透深度頗為狹窄,僅侷限于界面附近0.1微米的帶狀區域,故能選擇性激發臨近界面的熒光分子。
漸逝場中的熒光標記分子經激發所放出的熒光訊號,經高數值孔徑的物鏡收集后,

分別以電荷耦合元件(CCD)及雪崩式光二極體(APD)偵測。電荷耦合元件的優點在于空間的解析與多個單分子資訊的同時擷取,
雪崩式光二極體的優點在于時間解析度,可用于單頻道或雙頻道的光子計數,以進行時間系列的解析。 

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