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夾層培養法
先在培養皿里倒入一層不含菌的基本培養基,待冷凝以后,加上一層
含菌的基本培養基,冷凝后再加上一層不含菌的基本培養基。經培養出
現菌落后,在培養皿底部把菌落儆上標記,然后在基本培養基上加一層
完全培養基,再經培養以后出現的菌落多數是營養缺陷型。上下兩層基
本培養基的作用,是使菌落夾在中間,免于細菌的移動或為完全培養基
所沖散
實驗通過酵母菌單倍體細胞的分離、酵母菌單倍體細胞的群體雜交
、根霉接合孢子的形成三個實驗,以了解脖母菌的生活史,觀察微生物
的有性生殖過程,初步掌握微生
物雜交育種的方法。
酵母菌單倍體細胞的分離
酵母菌的雜交育種或原生質體融合育種均需要單倍體細跑,對于酵母
菌單倍體細胞的獲得,可以借顯微操作器的玻璃微針解剖子囊取出孢子
,也可通過酶解子囊使子囊破除,子囊孢子散出,然后用熱處理法殺死營
養細胞,再經分離、培養而獲得單倍體細胞,這種徒手分離酵母單倍體
細胞的方法,對不具備顯微操作器的單倍更有現實意義。獲得了單倍體
細胞后,再用物理或化學誘變劑處理,對其進行營養標記或其他標記。
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