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流動雙折射
由于桿狀細菌的運動會引起流動雙折射,因此,桿狀細菌懸浮液
的混濁度比球狀細菌懸浮液的混濁度更難于準確測量。這種運動是由
將細胞傾入比色杯時給予細胞的運動以及來自光束的吸收熱產生的熱
攪拌所引起的。這兩種運動來源的結合,導致光度計緩慢地并且有些
飄忽不定地達到平衡點。維生素測定中的最大誤差可能是由流動雙折
射引起的誤差。長桿狀細菌在普通的光度計中,實際上不能準確地,
迅速地測量混濁度。這是人們寧愿選用球狀細菌,或者在最壞的情況
下,要選用短桿狀細菌作為測定菌的一個原因。
桿狀細菌懸浮液的混濁度,可以在沒有由流動雙折射引起的誤差
的情況下被測定。:通過測量以大約1.5~2毫升/秒的速度流經亞瑟
·赫·托馬斯公司9120—N05流動槽的懸浮液的吸光度,可以做到這一
點。已經發現,其他的流動槽都不符合要求。這種流動槽裝有聚乙烯
管和一根8英寸長的、19—規范的不銹鋼管作為樣品探測器。調節真空
度以獲得適當的流動速度。常常有小氣泡落在流動槽內, 因而得到
;錯誤的讀數。利用在流動槽和真空源之間真空管道的暫時關閉產生
的水擊作用,可以除去氣泡。在開始流動后,管道應該關閉大約一秒
鐘。一段橡皮管上加一個夾鉗是控制流速的適當的裝置。
光度計的校準
對細菌生理學的一些問題,并不需要知道細菌群體的絕對數量;
而是通過與細菌數量成正比的相對數字來表達必要的信息。
重要的校準是在儀器的反應與細胞的相對濃度之間建立一定關系
。校準曲線的總的形狀似乎與微生物無關。曲線的形狀對活舶和加熱
殺死的金黃色葡萄球菌是相同的。
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