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重組體分子克隆的選擇或篩選。
單個基因僅占染色體DNA分子總量極其微小的比例,必須經過擴增
,才有可能分離到特定含目的基因的DNA片段,因此需要先構建基因文
庫(gene library),或者叫做DNA文庫,它們由來自染色體基因組DNA的
全部DNA片段組成。
用于基因克隆的DNA材料的來源,主要是從特定組織提取的染色體
基因組DNA或mRNA反轉錄成的eDNA。究竟選用何種DNA材料,取決于所解
決的問題的特殊性。如果所研究的目標是要弄清楚一種蛋白質的氨基酸
順序,則可以根據克隆的eDNA序列直接推導出來。如果研究的是控制基
因表達活動的調控序列,或是在mRNA分子中不存在的某種特定序列,則
應該從染色體基因組DNA中獲得。由此可見,用于基因克隆的DNA材料選
擇是一個重要的問題,它決定了究竟采用eDNA克隆還是基因組克隆。
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