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微生物可在瓊脂平板上生長,通過劃線獲得微生物單菌落
如果一種微生物可以在瓊脂平板上生長,就可以通過劃線獲得該微
生物的單菌落,每個這樣的單菌落都應該是由一個原核生物細胞生
長而形成的。這項工作可以通過劃線稀釋和滅菌手段實現。第一次
在固體瓊脂平板上接種可能會引入數以百萬種細菌,但是接種環每
次劃過平板這些細胞就會與相鄰的細胞拉開一定的距離。每次劃線
后對接種環進行滅菌,這樣在畫出的最后一根線上細菌的數量就會
少于10個。
許多原核生物細胞不能在瓊脂平板上生長。如果發現是這種情
況,那么類似的稀釋操作就要在液體培養基中進行,這樣也可以獲
得純培養物。用無菌的移液管將1mL初始培養物加入到9mL滅菌的新
鮮培養基中(形成10倍稀釋物)。101稀釋液充分混勻后,再取lmL
加入到9mL滅菌的新鮮培養基中(形成100倍稀釋物,記作10-2)。這
種操作重復lo或12次之后進行培養。能夠生長的最低濃度的稀釋物
就可能是從少于10個細胞的接種物生長而來。因此,重復這種操作
最終可以獲得純培養物。這種方法可以通過增加每個10倍稀釋梯度
的份數進行改良。
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