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直接測量法
與培養法不同,直接側定法在側試過程中不需要SRB生長,而是直接檢測SR B的存在
(包括SRB苗體的存在或SRB細胞所含化合物的存在)。
①顯微鏡直接計數法一般認為顯微鏡只能測出系統細菌的總數,不能檢出SRB的數
級。用異硫佩酸鹽熒光素(FITC)和間接熒光抗體
技術(IFA)可定承檢測細細菌總數和SRB含盆.它的原理是,FITC染料可粘附到任何蛋白質
上,微生物經FITC處理后,在配有熒光的顯微鏡下,將染色細菌放大1 000或1 600倍就可觀
察,側得細菌總數;而IFA間接熒光抗體只能在SRB上著色,在
熒光顯微鏡上觀察可得到
SRB的數最.該方法的關鍵是染色劑的開發,它經實驗室制成后,可冷藏保存,使用多年。
顯微鏡計數最大的特點是快速,但需特定的染料及受過培訓的操作人員;由于該技術不
能分辨細菌的死活,一些死菌體也被計人,故顯微鏡計數往往偏高。
② ATP法三確酸腺昔(ATP)是所有活的生物細胞中都具有的一種化合物. ATP法通
過側定水樣中ATP的含盆來檢測水樣中的生物總數。由于在油田污水注水系統中ATP主要
來自于細苗(包括SRB),因此有人提出ATP法可用于油田污水注水水樣檢測包括SRB在內
的細菌總數。
ATP法的基木方法是,先過濾水樣去除其中的溶解性固體和鹽類(它們可能干擾洲定試
驗),在過濾后的水樣中加人一種試劑(如三經甲氨基甲烷)在一定條件下使細胞中的ATP釋
放出來,再加人一種特殊醉(熒光素酶)。這種醉能與ATP作用引起光化學反應,該反應所
產生的光強是定量的,即每個ATP產生1個光單位。通過光度計測定光強,并查閱標準光強
—菌最關系曲線,則可得到水樣中的細苗總數。
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