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制片材料可取于自然生長或人工培養的原葉體。用Costollo
氏法培養的原葉體比較潔凈。方法是:填滿泥炭醉于一只多孔的
花盆內,以水淋濕花盆的外面。倒置于水盆中,保持水深約3 cm.
散播蕨類孢子于花盆之外表面,罩以大玻璃饑注意保持水盆內
之水不千。在適宜的溫濕條件下,培養2-3星期后,原葉體上即
可相繼產生精子器和頸卵器。
制片時,將原葉體放在實體
顯微鏡下觀察清楚精子器和頸卵
器的部位,再用鋒利的刀片切去原葉體兩側的不育部分。用水洗
凈材料后浸入1%鉻酸一醋酸固定液或FPA內固定1天。以50%
酒精及蒸餾水浸洗各經1ho置于1%苯胺番紅液內染色2天。
經各級酒精脫水,四級氯仿透明,每級中浸30 min。再經浸蠟和
石蠟包埋。切片時,平行原葉體中軸縱切,切6-8μm厚。
切片以固綠復染制成永久玻片標本。
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