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本文標題:"將玻片放到倒置式顯微鏡的載物臺上觀察昆蟲的結構"

新聞來源:未知 發布時間:2013-8-19 23:50:32 本站主頁地址:http://www.pzfczx.com

將玻片放到倒置式顯微鏡的載物臺上觀察昆蟲的結構


顯微注射
1.取一完成的 microinjection pad,在上面呵氣,迅速滴上一滴Halocarbon oil 700。
2.重復三、(二)的 7.,利用挑蟲用針前端的睫毛輕輕滑過線蟲皮膚,
使其滾動到其腹部朝上,可以看到白色條狀物。
3.可重復數次,將數只蟲固定在 microinjection pad 上并調整好其位置以方便后續的注射。
4.將玻片放到倒立式顯微鏡的載物臺上,使用低倍率并調整線蟲的焦距,將要注射的蟲移到視野的中央
5.利用粗調節輪調整針的上下位置,使針頭下降到油中。
6. 為確保其針管流通,輕壓與握針器連接之針筒,觀察是否有液體流出。
7.轉成較高倍率,調整針使之與蟲位于
同一平面。可用針頭輕輕碰蟲觀察前端使否可碰觸到線蟲的最外層體壁。
8.將針輕壓滑過蟲的腹部,待針插入卵巢后微微抽出,緩慢地壓針筒,
使針里面的液體流入卵巢。等到蟲的卵巢有明顯脹大即停止壓針筒并
小心地抽出針。
9.將針微微上移,轉回低倍率的視野。
10. 調整線蟲的焦距,將其他要注射的蟲移到視野的中央。
11.重復 6.~8.將含有要放入的 DNA 液體注入要注射的蟲。
12.用粗調節輪將針往上移離玻片,將玻片移開倒立式顯微鏡。
13.取另一玻片在上面滴上一滴油,放
到倒立式顯微鏡的載物臺上,利用粗
調節輪小心地調整針的上下位置,使
針的前端微微下降到油滴中即可,避免碰到玻片的底部
11.在有注射完成的線蟲之玻片上滴上 PBS,
   在顯微鏡下觀察線蟲是否有離開 microinjection pad 并游動。
12.將線蟲挑起放入 24 well 中的其中一個 well 并標示,待其產卵、孵化(約需 2~3 日),
并注意其復原狀況

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