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培養基配制_制作液體培養基步驟
原理
培養基依瓊脂的濃度不同可分為液體、半固體與固體培養基。液體培養基通常不含瓊脂;半固體培養基的瓊脂濃度則是低于1%;
而固體培養基的瓊脂含量則為15~18%。另外,固體培養基依做法的不同亦可分為斜面及平板培養基。培養基的制作即利用作法及原料比例濃度不同的原理來進行配制。
液體培養基
取25 g的營養培養基粉末,倒入250 ml的燒杯。
量取100 ml的蒸餾水或去離子水加入含有營養培養基粉末的燒杯中。
放入磁石攪拌子,并將燒杯置于電磁攪拌器上,充份攪拌使其均勻溶解。
加入1 N HCl或1 N NaOH調整培養基之pH值至73。
以塑膠滴管吸取每管9 ml之液體培養基加入玻璃試管中并蓋上管蓋,接著貼上滅菌指示帶。
將試管置入高壓滅菌釜中以121℃,15分鐘進行滅菌。
待滅菌完成后進行洩壓,取出試管冷卻備用。
固體培養基
取135 g的營養培養基粉末與75~15 g的瓊脂,倒入500 ml的血清瓶中。
量取500 ml的蒸餾水或去離子水加入含有營養培養基粉末與瓊脂的血清瓶中。
放入磁石攪拌子,并將血清瓶置于電磁攪拌器上加熱,充份攪拌使其均勻溶解。
加入1 N HCl或1 N NaOH調整培養基之pH值至73。
將調整pH后之血清瓶,貼上滅菌指示帶。
置入高壓滅菌釜中以121℃,15分鐘進行滅菌。
待滅菌完成后進行洩壓,取出血清瓶并將其冷卻至45~50℃。
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