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馬鈴薯Y病毒屬診斷技術
1.生物學測定接種紅藜或奎藜,PRSV-W和ZYMV都可造成局部壞疽斑,再利用其他判別植物,即可鑑別二者。
2.電子
顯微鏡觀察利用陰染法可觀察到病毒顆粒,呈長絲狀,大小約750nm x 12nm,但無法鑑定病
毒種類。必要時以抗體捕捉及修飾,進行免疫吸附電子顯微鏡觀察可提高檢出率及輔助鑑定。
3.內含體的鑑定PRSV和ZYMV都會在寄主細胞內形成風車狀內含體,可經超薄切片以電子顯微鏡觀察。
4.血清學反應傳統多元抗體應用在凝集法、瓊脂雙擴散法、酵素連結免疫檢測法、免疫點漬法外,單元抗體的應用及各種改良式抗原抗體反應法的發展,使檢測的靈敏度大為提高。
5.鞘蛋白的鑑定進行SDS-PAGE,利用鞘蛋白亞基分子量的不同可鑑定病毒屬,再以抗體染色進行西方墨漬法,可準確鑑定病毒種。
6.反轉錄聚合酶鏈反應(Reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)當樣品量極少或病毒在組織中濃度很低時,用上述方法檢測不到時,用RT-PCR方法則會獲得較靈敏的效果。且其特異性強,必要時可進一步分析核酸組成,完成病毒種與系統(strain)的鑑定
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