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在水質污染菌的調查研究中,需要確定污染細菌的種類或類型時,僅僅
用生理生化方法鑒定還不夠,特別是對腸桿菌科的一些細菌的檢驗有必
要借助免疫學反應進一步作種間與種內的鑒別。
這是由于此種免疫血清中含有結合性的物質y-球蛋白,稱為抗體,與
此相對應的異構物則稱為抗原。用于微生物鑒定的抗原物質是位于微
生物體表,如鞭毛、莢膜、細胞壁的多糖類等。鞭毛抗原稱為H抗原,莢
膜抗原稱為K抗原,細胞壁抗原為O抗原抗原和抗體的結合具有嚴格的特
異性,則可用已知抗體檢?未知抗原,常用已知的免疫血清來鑒定未知的
污染水中的病原菌。此類反應是在體外進行。如在試管中,通常由于抗
原的物理狀態不同(顆粒性或可浴性)和參加反應的輔助因素不同(如補
體、電解質),以及操作方法的不同,常可
沉淀反應的試驗
此反應與凝集反應相似,都是抗原微粒在電解質的環境中,由于與
抗體的作用而集結,不同的是抗原的大小不致。在凝集反應中,抗原微
粒是顯微鏡下可見的細菌細胞而沉淀反應中的抗原微粒呈膠體狀態,其
大小接近分子水平。沉淀反應比凝集反應的靈敏度高,特異性更強,故
有些鑒定工作用沉淀反應更合適。鑒定方法如下
①用生理鹽水將待測菌制成濃菌液,立即加0,5%苯酚防腐.放入冰箱
內保存6星期,每天搖動1―2次。
②取保存的菌液離心,去沉淀物,得清凈透明的細菌蛋白質提取液
⑧將0,1毫升完全澄清的抗血清(或其適當的稀釋液)加到6×25毫米
的小試管中
④取待測菌的蛋白質提取液(即抗原)0.1毫升,小心地注入管內,使其
在抗血清上面成為另一液層。如果在5一15分鐘內于兩液界面上形成一
個白色沉淀環,則為陽性反應。所以此種反應也稱環狀沉淀反應在此試
驗法中的血清使用量不變,而抗原則必須稀釋,
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